Translokation dutch den NPC
Mechanismus?
Nucleopurine haben sich wiederholende sehr hydrophibe Sequenzen
--> interagieren mit dem Transportrezeptoren
Intrazellulärer Membrantransport 1
Wie werden Transmembranproteine in die ER-Membran eingebaut?
Sec61-Kanal kann sich seitlich öffnen, wodurch hydrophobe transmembranseq. Eingebaut werden können.
--> positiv Regel
NES-Vermittelter Kernexport
Welche Substrate werden Exportiert?
tRNA, rRNA (Ribosomen), UsnRNA, mRNA, shuttle Proteine
Translokation durch NPC
Aufbau?
Besteht aus Nucleoporinen
NLS-Vermittelter Kernimport
Was sind die Rezeptoren?
-Heterodimer aus Importin Alpha und Importin Beta
Und der Cargo ( hier NLS)
NLS-Vermittelter Kernimport
Was definiert ein Signal?
1) es muss decodieebar sein
2) Inaktivierung durch Mutationen
3) Signaleigenschaft muss auf inertes Molekül übertragbar sein
NLS-Vermittelter Transport
Welche Interaktionen vermitteln die NLS-Rezeptoren?
- Imp. Beta: NPC-Bindung
- Imp. Alpha: Bindet die Ladung
Durch RanGTP wird dieser Komplex wieder aufgelöst
Intrazellulärer Membrantransport 1
Beschreibe die Signalsequenz, welche ein Protein für die Translokation ins ER definiert
Signalsequenz ist am N-Terminalen ende
Meist positiv geladen
Alpha helix aus hyrdophoben AS
Polar/ klein hydrophob
NLS-Vermittelter Kernimport
Welche Rolle spielt Ran?
-Dissoziiert Importin Komplex
-über Ran Gradient geregelt
-->zytoplasma hat hauptsächlich RanGDP, durch RanGAP reduziert
-->Zellkern hauptsächlich RanGTP, wird durch TanGEF oxidiert
Intrazellulärer Membrantransport 1
Posttranslationale Translation von Proteinen ins ER/ die ER-Membran
1) Synthese der Proteine im Cytosol
2) Erkennung der Sognalsequenz (Hsp70/ Hsp40)
3) Transport zu ER: Interagieren zuerst mit Sec62/63 und danach bindet es an Sec61
4) Einfädelunf in das ER --> Sec62/63 und ein ATP-abhängiges Chaperon (Bib) helfen bei der wanderung durch den Kanal
5) Freisetzung und Faltung
NES-Vermittelter Kernexport
Mechanismus der News-Erkennung
1) Exportrezeptor wird durch Crm1/Exportin erkannt
2) in den zellkern transportiert
3) RanGTP bindet, sodass Cargo binden kann
4) im Zytoplasma wird der komplex von RanBP1 und RanGAP dissoziiert
Intrazellulärer Membrantransport 1
Ablauf der co-translationalen Translokation eines Proteins ins ER
1) Signalsequenz wird vom SRP gebunden
2) Das SRP und der SRP-Rezeptor rekrutieren Ribosomen an Sec61-Kanäle in der ER-Membran --> polypeptid wird durch die Pore geführt
3) eine Signalpeptidase trennt die Signalsequenz ab
4) Ribosom synthetisiert weiter, direkt ins lumen
5) Das Ribosomdissoziiert wieder vom Sec61-Kanal
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